Качественное определение ДНК ВПЧ 14 типов (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59,) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта методом ПЦР с детекцией в режиме реального времени.
Вирусы папилломы человека (ВПЧ) широко распространены, поражают эпителий кожи и слизистых оболочек и обладают онкогенным потенциалом. ВПЧ передается при тесном контакте с инфицированным эпителием, поэтому основные пути заражения – половой и контактно-бытовой. Человек может быть инфицирован несколькими типами ВПЧ.
К факторам, провоцирующим развитие ВПЧ-инфекции, относятся: ранее начало половой жизни, большое количество половых партнеров, сниженный иммунитет, применение оральных контрацептивов, авитаминозы, инфекции, передаваемые половым путем, курение и проживание в крупных городах.
Инкубационный период может длиться от 2 месяцев до 2-10 лет. Характерно скрытое течение заболевания, при котором отсутствуют клинические проявления, а при кольпоскопическом, цитологическом и гистологическом обследовании выявляется норма. В 30 % случаев в течение 6-12 месяцев может произойти избавление от вируса. Диагностика скрытой ВПЧ-инфекции осуществляется только методом ПЦР.
Объединение ДНК папиллома-вируса с геном клетки приводит к дисплазии/неоплазии (чаще всего в переходной зоне шейки матки). К папиллома-вирусам высокого онкогенного риска относятся ВПЧ типов 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68. Инфицирование ими приводит к относительно доброкачественному бовеноидному папулезу или плоскоклеточным интраэпителиальным неоплазиям шейки матки.
Для выявления ВПЧ высокого онкогенного риска используется в основном полимеразная цепная реакция в режиме реального времени, которая позволяет найти ДНК ВПЧ в исследуемом биоматериале и идентифицировать его отдельные типы. Принцип метода основан на амплификации (многократном увеличении числа копий) специфичного для данного возбудителя участка ДНК.
Хранение: При комнатной tº - 48 часов, при tº +2…+8 ºС – 14 дней.
Транспортировка: В вертикальном положении в термоконтейнерах при tº +2…+8 ºС.
Общие показания:
- 1.Наличие папилломатозных разрастаний и изменений на слизистых оболочках половых органов.
- 2.Контроль проводимой терапии;
- 3.Скрининг специальных групп женщин.
- 4.Стартовый возраст для начала скрининга:
- с 21 года или в течение 3 лет после начала половой жизни;
- с 21 года или в течение 3 лет после начала половой жизни;
- с 30 лет для новых программ (основанных на выявлении ДНК ВПЧ) или с 25 лет для существующих программ (классическое цитологическое исследование).
- 5.Специальные группы, которым показан скрининг:
- женщины, имеющие в анамнезе рак шейки матки;
- женщины в возрасте 25-65 лет, которым никогда не проводилось цитологическое исследование или проводилось более 3 лет назад;
- женщины с кровотечением в репродуктивном периоде, кровотечениями после наступления менопаузы, посткоитальными кровотечениями.
Референсные значения: отрицательно.
Причины положительного результата:
Инфицирование папиллома-вирусом.
Причины отрицательного результата:
Отсутствие папиллома-вирусной инфекции.
Низкое содержание ВПЧ в крови.
За 10-14 дней до взятия материала на исследование необходимо прекратить прием антибактериальных, противовирусных, противогрибковых, антисептических препаратов, пробиотики и эубиотики для перорального и местного лечения (вагинальные свечи, лечебные тампоны, спринцевание с лекарственными препаратами). Материал у женщин желательно брать перед менструацией или через 1–2 дня после ее окончания. Перед взятием материала необходимо воздержаться от мочеиспускания в течение 2–3 часов (для женщин — по возможности). Женщины накануне исследования не должны проводить гигиену наружных половых органов с использованием мыла и других гигиенических средств. За 48 часов необходимо воздержаться от половых контактов, женщинам не проводить вагинальный душ и любые гинекологические процедуры (осмотр гинеколога, кольпоскопию, УЗИ с использованием вагинального датчика и т.п.).
Внимание!
- Взятие материала у беременных женщин осуществляется на сроке не более 22 недель 0 дней;
- Взятие материала осуществляется только после начала половой жизни!
Особенности хранения и транспортировки проб:
Подробно правила взятия соскобов и другого биоматериала (мокрота, эякулят, моча и т. п.) описаны в «Правилах взятия, хранения и транспортировки биологического материала»
Хранение: при комнатной температуре — в теч 48 час., при tº +2 +8 ºС до 2 недель, при tº
Факторы влияющие на результат:
Основные причины ложноотрицательных результатов: не соблюдение правил подготовки к сдаче анализа, отсутствие возбудителя в месте получения биологического материала в достаточной для анализа концентрации (аналитическая чувствительность — не менее 1000 микробных клеток на 1 мл пробы).
