Грипп А/В. Выявление РНК вируса гриппа А, В с типированием вируса гриппа А

Исследование, направленное на количественное определение генетического материала (ДНК) вируса гриппа А (Influenza A virus), вируса свиного гриппа (A/H1N1 pdm09), вируса сезонного гриппа (A/H3N2) и вируса гриппа В (Influenza В virus) в соскобе эпителия методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени» (ПЦР-РВ).

Influenza virus (вирус гриппа) – оболочечный вирус, характеризующийся наличием сегментированного негативного РНК-генома и нуклеокапсида в форме спирали. Он относится к семейству Orthomixoviridae. На основании структурных различий нуклеопротеида выделяют 3 серотипа Influenza: A, B и С. Серотип A встречается как людей, так и у животных, в то время как варианты B и C поражают преимущественно людей. Именно серотип А ответственен за подавляющее большинство случаев сезонных (эпидемических) и пандемических вспышек гриппа.

Вирусная частица имеет сферическую форму, в центре которой находится генетический материал вируса – РНК, а в оболочке присутствуют сложные белки – гемагглютинин (Н) и нейраминидаза (N). Для вирусов гриппа типа А характерна постоянная изменчивость этих поверхностных белков: на данный момент известно 15 вариантов гемагглютинина и 9 вариантов нейраминидазы. Их сочетание в определенной комбинации определяет субтип вируса. В данном исследовании определяется 4 субтипа вируса гриппа А: Н1 (свиной), H5N1 (птичий), H1N1 и H3N2 - вызывают сезонный грипп человека.

Идентификация вируса гриппа должна быть осуществлена в кратчайшие сроки, что связано с высокой заразностью этого заболевания. Кроме того, эффективность противовирусных препаратов максимальна при их назначении в первые 48 часов после инфицирования, что также диктует необходимость своевременной постановки окончательного диагноза.

Принцип метода ПЦР основан на обнаружении в материале специфичных фрагментов генетического материала вируса, его избирательном синтезе с образованием огромного числа копий, что позволяет их легко детектировать, в том числе визуально.