Исследование фрагментации ДНК сперматозоидов

Определение количественного показателя целостности ДНК человеческих сперматозоидов, для получения дополнительной информации о степени мужской фертильности.
Обычно исследование спермы – спермограмма, основывается на изучении структуры сперматозоидов, их концентрации и подвижности. До недавнего времени, причины мужского бесплодия не определялись у 30-40% бесплодных мужчин. Было установлено, что повреждение ДНК- генетического материала сперматозоидов может объяснять высокий процент подобных случаев. Сперматозоиды с поврежденной ДНК при стандартном исследовании спермы могут показывать себя как нормальные в плане подвижности, концентрации и структуры, но при этом не обладать способностью к оплодотворению. Нарушение целостности ДНК сперматозоидов может быть связано как с упаковкой поврежденной ДНК, так и с дефицитом протамина, необходимых для компактизации ДНК в сперматозоидах. Поврежденная ДНК сперматозоида может стать причиной задержки развития бластоцисты и спонтанного аборта. У 25% мужчин с нормальными результатами спермограммы выявляется высокая доля сперматозоидов с фрагментацией ДНК, т.е. повреждением генетического материала. Исследование хроматина сперматозоидов дает возможность подсчитать количество сперматозоидов с фрагментированным ядерным материалом. В места разрыва ДНК с помощью энзиматической реакции встраивается флуоресцирующий меченый нуклеотид*. Под микроскопом подсчитывается доля неповрежденных и поврежденных сперматозоидов. Исследование фрагментации нуклеиновых кислот может быть выполнено одновременно со спермограммой из одного и того же образца биоматериала.
При наличии повреждений генетического материала может быть рекомендовано ЭКО/ИКСИ (интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида). В супружеской паре у мужчин, с повышенным индексом фрагментации ДНК сперматозоидов, намного чаще, чем в парах с нормальным индексом фрагментации, наблюдается потеря беременности на ранних сроках (до 12 недель). Своевременное обнаружение и дальнейшая коррекция индекса ДНК-фрагментации с помощью специальной терапии увеличивает шанс наступления и нормального протекания естественной беременности.
* Тест основан на принципе хроматиновой дисперсии (SCD-test). Неповреждённые сперматозоиды (свежие, замороженные, размороженные) иммерсируют в геле инертной агарозы на пред-подготовленном слайде. Кислотная обработка денатурирует ДНК и позволяет дифференцировать фрагментированные спермальные клетки. Лизирующий раствор растворяет белки ядра. В клетках с нормальным уровнем ДНК петли ДНК расширяются, формируя HALO – свечение ДНК – хроматиновой дисперсии. В клетках с поврежденной ДНК, свечение отсутствует или минимально.