Коринебактерия дифтерии Corynebacterium diphtheriae- качественное определение ДНК

ПЦР-исследование, направленное на выявление и дифференциацию токсигенных и нетоксигенных штаммов C. diphtheriae.

Дифтерия – острая инфекционная болезнь, вызываемая токсигенными коринебактериями дифтерии (Corynebacterium diphtheriae, или бациллы Леффлера), характеризующаяся воспалительными изменениями слизистых или кожи с образованием фибринозных пленок и токсическими поражениями ряда органов, преимущественно сердечно-сосудистой и нервной систем. Местом локализации воспаления служат слизистые рото-, носоглотки и верхних дыхательных путей, реже - слизистые конъюнктивы, половых органов, кожные покровы, раневые поверхности.

Источником возбудителя инфекции являются больные различными формами дифтерии или носители токсигенных коринебактерий. Путь передачи – воздушно-капельный и воздушно-пылевой. Возможна передача инфекции через предметы обихода и третьих лиц (контактно-бытовой путь), а также пищевым путем, через инфицированные продукты (молоко). Инкубационный период заболевания возможен от 2 до 10 суток (чаще 3-5 суток).

Выделяют следующие формы дифтерии: дифтерию глотки (дифтерийная мембранозная ангина, тонзиллярная дифтерия) – часто встречаемая форма дифтерии (90-95% случаев), гортани (по частоте регистрации занимает второе место), носоглотки, кожи, другие формы дифтерии (конъюнктивы, носа, половых органов, комбинированная, дифтерийный миокардит, полиневрит) и неуточненную дифтерию.

Основной фактор патогенности – дифтерийный токсин (ДТ), последовательность которого кодируется геном tox. Вирулентные штаммы могут нести в геноме две или три копии гена tox. Именно токсигенные Corynebacterium diphtheriae являются возбудителем дифтерии – они выделяют токсин, который вызывает отёк и некроз слизистых, поражает миокард, периферические нервы (особенно часто – языкоглоточный и блуждающий с развитием паралича мягкого нёба), почки.

Первичное бактерионосительство C. diphtheriae является бессимптомной формой инфекционного процесса. Оно может быть транзиторным (однократное обнаружение возбудителя), кратковременным (выделение в течение 2-х нед.), средней продолжительности (до 1 мес.), затяжным (1-6 мес.), хроническим (более 6 мес.). Продолжительное носительство часто выявляется у детей с патологией ЛОР-органов (хронический тонзиллит, аденоидит, синусит), у часто болеющих детей, при дисбиозе слизистой оболочки ротоглотки и носа.

Формирование бактерионосительства токсигенных штаммов С. diphtheriae происходит, как правило, у лиц на фоне высокого уровня антитоксических антител и неполноценного антибактериального иммунитета. Бактерионосительство развивается за счёт факторов адгезии, инвазии, колонизации, имеющихся у токсигенных и нетоксигенных штаммов C. diphtheriae, а также способности к биоплёнкообразованию. Дифтерийный токсин, продуцируемый С. diphtheriae, поступает в лимфатическую систему и кровоток. При наличии антитоксического иммунитета у инфицированных лиц, как правило, не возникает ни местных, ни общих проявлений действия токсина и инфекционный процесс ограничивается бессимптомной колонизацией, т. е. носительством.

Основным методом диагностики и подтверждения дифтерии является бактериологический посев с выделением токсигенных штаммов C. diphtheriae (утверждено действующим СанПиН 3.3686-21 "Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней" от 28 января 2021 г.).

Однако, другие методы также имеют свое вспомогательное значение. Исследование №1270 «Коринебактерия дифтерии Corynebacterium diphtheriae – качественное определение ДНК» – направлено на выявление ДНК и дифференциацию токсигенных и нетоксигенных штаммов C. diphtheriae в биологическом материале.

Преимуществами данного исследования является:

1. При использовании ПЦР, гены, ответственные за продукцию дифтерийного токсина, обнаруживают в минимально короткие сроки;

2. Наличие в аналите микроорганизмов-контаминантов не влияет на результаты исследования.

Следует иметь в виду, что некоторые C. diphtheriae, имеющие ген токсина, не способны продуцировать токсин (не являются токсигенными). В связи с этим, после получения положительных результатов ПЦР исследования (обнаружение ДНК C. diphtheriae с геном токсина C. diphtheriae), токсигенность C. diphtheriae рекомендуется дополнительно подтверждать с использованием других лабораторных методов, в соответствии с действующими нормативно-методическими документами.

При постановке диагноза «дифтерия», помимо данных лабораторного исследования необходимо также учитывать клиническую картину заболевания и данные эпидемиологического анамнеза. Комплексное применение различных методов и современных технологий значительно повышает эффективность лабораторной диагностики дифтерии.